n产品参数
产品名称 | 最低检测灵敏度 | 编号 | 规格 | 售价 |
特超敏化学发光检测试剂盒 (Ultra sensitive ECL Detection Kit) | 低飞克级及以下 | EUL001 | 2×50 mL | ¥1,388.00 |
EUL002 | 2×100 mL | ¥2,488.00 |
EUL003 | 2×250 mL | ¥4,888.00 |
n产品简介
本试剂盒是基于鲁米诺底物的化学发光试剂盒,用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶(HRP)的抗体及其关联的抗原。主要应用于Western检测以及化学发光免疫检测系统。检测原理是,蛋白混合物经电泳后转移到印迹膜上,经辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗体与膜上的蛋白直接或间接特异反应,然后发光检测工作液被辣根过氧化物酶(HRP)催化发光,发出特定波长荧光(400-450 nm),从而可以通过X光胶片压片曝光或化学发光成像设备直接扫描检测信号。
本试剂盒使用了新型高效增强剂,发光强度比传统ECL显色液显著提高,并有效降低了背景。本司提供三款不同检测灵敏度的ECL试剂盒,可适配不同丰度的目的蛋白检测,对于丰度比较高的目的蛋白的检测,例如内参蛋白等的检测,推荐使用性价比更高的高敏型试剂盒;对于低丰度较难检测的目的蛋白,优先推荐使用特超敏试剂盒。
n保存条件
2-8℃保存,有效期12个月。Solution A 需注意避光保存。
n使用方法
1. 按常规 Western blot 操作进行,二抗孵育后,在进行最后一次洗涤时根据膜的大小(每10 cm2 膜混合 0.5 mL Solution A 和0.5 mL Solution B),按照 Solution A: Solution B=1:1比例配制发光检测工作液。
注:工作液建议现配现用,配制后室温放置数小时后灵敏度可能略有降低。
2. 用平头镊子将膜取出,膜的下缘轻轻接触吸水纸,以去除膜上多余的液体。膜的蛋白面朝上,用吸管将配制的发光检测液转移到蛋白膜上,使其均匀覆盖,室温孵育 2 min。
注:增加孵育时间不会增加灵敏度,有时还会导致条带曝光时显示异常。发光过程的本质是酶促反应,加入发光液过少同样不利反应进行,会导致膜上条带曝光不均和灵敏度明显降低。
3. 用平头镊子夹持蛋白膜,膜的下缘轻轻接触吸水纸,以去除膜上多余的发光液。将膜的蛋白面朝上并包裹于洁净保鲜膜内,轻轻赶出气泡。
4. 压片检测:将膜固定在暗盒后,暗房内取出X光胶片放置暗盒中压片1分钟,立即显影定影,根据其曝光结果,缩短或延长下一张X光胶片的压片时间。
5. 化学发光成像仪检测:将膜直接放置于化学发光成像仪载物台中,然后参考仪器的说明书进行信号检测。
n温馨提示
1.Solution A 和 Solution B 在吸取过程中必须要更换枪头,两种溶液相互污染后会导致逐渐失效,影响后续的使用效果;
2.各溶液使用后,请盖紧瓶盖,以防失效;
3.ECL的荧光持续时间很长,但开始反应后的 30 分钟内荧光更强一些,随后荧光会逐渐减弱,因此请注意充分利用这荧光较强的 30 分钟进行压片;
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
5.本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内!
博鹭腾选择指南:
BLT | High Sensitive ECL 高敏型 | Super sensitive ECL 超敏型 | Ultre sensitive ECL 特超敏 |
适用情景 | 标靶蛋白丰度较高,常规蛋白样本 | 标靶蛋白丰度适中,样本有限 | 靶标蛋白丰度极低,样品极为珍贵 |
检测灵敏度 | 低皮克级 | 中飞克级 | 低飞克级 |
信号持续时间 | >1h | >1h | >1h |
适用检测系统 | 均适用X射线胶片,CCD成像仪、CMOS |
推荐用膜 | NC膜、PVDF膜 | NC膜、PVDF膜 | NC膜、PVDF膜 |
推荐一抗稀释度 | 1:1,000-1:10,000 | 1:2,000-1:50,000 | 1:5,000-1:100,000 |
推荐二抗稀释度 | 1:2,000-1:10,000 | 1:20,000-1:100,000 | 1:100,000-1:250,000 |
储存稳定性 | 2-8℃ 1年 | 2-8℃ 1年 | 2-8℃ 1年 |
优势 | 同一级别灵敏度中发光信号更强 | 兼顾性能与性价比,适用于多数WB实验, | 出色灵敏度,极其适用于低丰度蛋白检测 |
相关产品及价格:
实验效果:
蛋白样品:人IgG蛋白连续稀释
一抗:兔抗人IgG(1:3000)
二抗:辣根过氧化氢酶-山羊抗兔IgG(1:10000)
拍摄仪器:BLT 6000pro II
曝光时间:统一曝光时间1s