类梯度免染PAGE凝胶制备试剂盒(10~250 kDa)

产品规格

规格

“博鹭腾新型快速类梯度免染蛋白电泳”

目录价/元

浓缩胶A液

浓缩胶B液

分离胶A液

分离胶B液

改良型促凝剂

SPGB001(50 T)

40 mL

40 mL

100 mL

100 mL

10 mL

228

SPGB002(125 T)

100 mL

100 mL

240 mL

240 mL

15 mL

468

 

产品简介

本产品是一款安全、快速、免染、具有类似梯度胶蛋白带型的广谱分离能力(10~250 kDa),低、中、高分子量蛋白可均匀分布的蛋白电泳凝胶系统产品,新型快速类梯度免染PAGE凝胶制备试剂盒提供了所需的所有试剂,无需专门的梯度胶配胶仪、梯度胶移液器或梯度制胶枪等设备,更无须配套的专用耗材,用户只需自备常规的电动移液器、移液管、制胶器具和蒸馏水,配合适当的操作方法,即可手工配制分离效果较好的类似梯度胶蛋白带型的免染PAGE梯度凝胶(Tris-Gly)。同时凝胶中包含了荧光染料,当电泳或者转膜完成后电泳或转膜后可直接置于成像仪中观察分离效果与转膜效率,无需染色,且不影响下游实验,帮助您节省时间提高检测效率。

50T规格可配制不同厚度的凝胶,配制数量分别为:0.75 mm/1.00 mm/1.50 mm 50-30块胶。

125T规格可配制不同厚度的凝胶,配制数量分别为:0.75 mm/1.00 mm/1.50 mm 125-60块胶。

 

保存条件

2-8 ℃保存,避光,有效期12个月。改良型促凝剂保存于-20℃时有效期12个月,保存于2-8 ℃时有效期3-6个月,为方便吸取使用,建议分装保存。

 

制胶操作流程

建议配胶时不要一次性配置太多块胶,避免来不及添加浓缩液(推荐最多2-3块)

1 制胶流程(以一块0.75/ 1.0/ 1.5 mm的胶为例)

1)分离胶的配置:取等体积分离胶A液和分离胶B液混匀,即取两种溶液各取1.9/ 2.5/ 3.35 mL,然后往混合溶液中加入38/ 50/ 67 μL的改良型促凝剂(凝固太快可减半促凝剂使用量,凝固太慢可增加一倍促凝剂使用量),充分混匀。

2)将步骤1中的溶液注入制胶玻璃板中。注意加入分离胶后要在2 min内将浓缩胶注入凝胶模具内,且在灌注浓缩胶时要缓慢,防止浓缩胶与分离胶混合在一起。如果个人觉得配置困难,也可改编为自行用乙醇封闭之后再进行配置浓缩胶。

3)浓缩胶的配置:取等体积浓缩胶A液和浓缩胶B液混匀,即取两种溶液各0.8/ 0.9/ 1.45 mL,然后加入16 / 18 / 29 μL的改良型促凝剂,充分混匀。

4)注入制胶玻璃板中,轻轻插入梳齿。

5)待10-20 min浓缩胶凝固后,拔去梳齿即可用于电泳。注:请尽量使用新鲜配置的电泳缓冲液。

2 观察电泳状况和转膜效率

凝胶从玻璃板上取下,整块凝胶放置在免染成像仪上,使用紫外光激发(发光的激发波长为345-356 nm,发射波长为500 nm)2-5 min后即可观察和拍照记录电泳和转膜情况。

 

注意事项

1.制备好的凝胶放入加有少量电泳缓冲液的密封袋中,可于 4 ℃存放数周。

2.改良型促凝剂的使用量仅作参考,实际用量可根据个人实验习惯和经验增加或减少。PAGE凝胶的凝聚速度与促凝剂的用量密切相关。加入较多量的促凝剂可加快凝胶速度,反之亦然。

3.凝胶速度与温度有显著的正相关性。同等条件下,温度越高,凝胶速度越快,室温过高时建议适当减小改良型促凝剂的用量;相反,如果室温较低,可适当增加改良型促凝剂的用量或延长凝胶时间。

4.彩色浓缩胶在储存过程中可能会产生少量沉淀,属正常现象,请放心使用。使用前请轻柔混匀。

5.本产品与传统的SDS-PAGE有本质区别,请按照产品说明书操作,如有疑问可以联系本公司技术人员。

6.本产品对人体有毒,操作时请特别小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入。

7.为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。