产品规格
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 售价(元) |
膜特异性外泌体富集试剂盒（磁珠法） | EXP011 | 1 T | 800 |
EXP012 | 5 T | 3400 |
产品简介
外泌体是由活细胞分泌的具有生物活性的膜结构物质，直径在50-150nm左右，并且不能自行复制的具有脂质双分子层的小囊泡。外泌体广泛分布于细胞上清，血液，尿液，脑脊液，唾液，滑液，羊水，牛奶中，在植物与细菌中也有分布。外泌体含有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等物质，在细胞间通讯、物质运输和免疫调节等方面发挥着重要作用。
膜特异性外泌体富集试剂盒（磁珠法）采用独特的分离技术特异性识别外泌体的膜结构，脂质探针靶向捕获外泌体，再通过与磁珠孵育从血清/血浆中收集外泌体，快速从血清/血浆中获得大量完整的外泌体颗粒，清洗后获得磁珠-外泌体的复合体，可直接裂解用于下游蛋白分析。
本试剂盒专用于血浆血清样本，不适用于细胞壁上清，脑脊液，尿液等样本。
产品组成及保存条件
组分名称 | 2T 规格（EXP011） | 10T 规格（EXP012） | 保存条件 |
脂质探针 | 30 μL | 150 μL | -20~-25 ℃，有效期6个月，使用前混匀 |
脂质探针稀释剂 | 4 mL | 20 mL | 2~8 °C保存，有效期一年 |
磁珠 | 0.2 mL | 1.0 mL | 2~8 ℃，有效期一年，不可使磁珠脱离磁珠保护液，使用前混匀 |
磁珠清洗液 | 1 mL | 30 mL | 2~8 °C保存，有效期一年 |
外泌体清洗液 | 1 mL | 30 mL | 2~8 °C保存，有效期一年 |
注：脂质探针和磁珠组分需要摇匀混合后再使用。
使用方法
需自备试剂和耗材：
（1）试剂：待分离的EDTA抗凝血； 1×PBS溶液
（2）装置及耗材：① 4 °C摇床或者旋转混匀仪②磁力架；③离心机④5 mL EP管；1.5 mL EP管
一．样本预处理：
新鲜血液样本建议参照以下步骤进行血浆分离：
1，取1~2 mL的新鲜EDTA抗凝血，加入1.5 mL离心管中，3000 g转速下4 °C离心20 min。
2，取黄色上清液于新的1.5 mL离心管中，12000 xg，4 °C离心10 min。
3，取上一步操作的上清液于新的EP管中，-80 °C保存或者立即实验。
二．探针孵育
4，吸取2 mL脂质体稀释剂于5 mL的离心管中，加入15 μL脂质探针(使用前先震荡混匀)。
5，吸取0.5 mL 的4 °C预冷的血清/血浆样本，加入稀释后的脂质探针溶液中，上下颠倒15次，置于4 °C摇床或者旋转混匀仪孵育30 min，摇床速度设置为约50 rpm。
组分名称 | 试剂体积 |
脂质探针 | 15 μL |
脂质探针稀释剂 | 2 mL |
磁珠 | 0.1 mL |
注：此体系可纯化0.5 mL 的血清/血浆样本，为最佳分离效率体系及比例，可以按比例增加血清/血浆处理量，但外泌体的分离效率略有下降。
三．准备磁珠
6，吸取0.1 mL磁珠(使用前先震荡混匀)于新的1.5 mL的离心管中，加入1 mL磁珠清洗液，于磁力架中静置3 min。
7，吸弃上清液，加入1 mL的磁珠清洗液，震荡混匀，置于磁力架上静置3min，再重复清洗一次。
四．磁珠捕获
8，吸弃磁珠清洗液，探针孵育后的血清/血浆样本加入其中，轻轻重悬磁珠，并转移至5 mL离心管于室温摇床或者旋转混匀仪孵育30 min，速度设置为约60 rpm；
9，孵育完成后，样本转移至2个1.5 mL离心管置于磁力架上静置3 min，吸弃上清。
五．磁珠捕获后清洗
10，向上步骤的磁珠沉淀加入外泌体清洗液1 mL，于磁力架上静置3 min，吸弃上清液清洗，重复清洗两次。
11，吸弃上清后，向管中加入50~100 μL PBS，震荡后的溶液即为含有外泌体的磁珠溶液，可保存于-80 °C的冰箱中，以备后续实验
注意事项
1．为了您的自身安全，实验前请做好有效防护。
2．清洗后获得的为磁珠-外泌体的复合体，可直接裂解用于下游蛋白分析，但其他表征如NTA或TEM 分析会受到影响。
3．本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内！