▶ 产品简介
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液,RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western Blot、IP、ELISA等。
▶ 产品规格
▶ 保存条件
-20℃保存,有效期12个月。
▶ 使用方法
根据使用量加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1 mM,混匀备用(PMSF现配现用)。
1.样品前处理
1)对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS,生理盐水或无血清培养液洗一遍按照6孔板每孔细胞量加入150-250 µL裂解液的比例加入裂解液,用枪吹打数下,使其充分接触;
2)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散,按照6孔板每孔细胞量加入150-250 µL裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞,充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解;
3)对于组织样品:把组织剪切成细小的碎片,按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量,用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2.样品后处理
将裂解后的样品10000-14000 g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western Blot、ELISA和免疫沉淀(immunol precipitation,IP)等操作。
▶ 温馨提示
1. 本产品请按使用情况适当分装保存,为取得最佳的使用效果,尽量避免反复冻融。
2. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3. 本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。