产品名称 | 产品编号 | 产品规格 | 售价(元) |
核酸凝胶染料(10000×) | FD-GBL001 | 500 μL | 480 |
n 产品简介:
BLT-GRed核酸凝胶染料(10000×)是一种灵敏、稳定、对环境安全的荧光核酸凝胶染料,功能同GelRed,可用于对琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶中的dsDNA,ssDNA以及RNA进行染色。其表现出了极高的灵敏度。与EB一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗,即可直接用紫外凝胶透射仪观察,独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果也表明,该染料的诱变性远远小于EB。
n 产品特点:
1,光谱特性:
Excitation:标准透射照明器(302 或 312 nm)
Emission:溴化乙锭,SYBR 或 GelStar
过滤器TBE 缓冲液中,BLT-GRed与 dsDNA 结合物的激发(左)和发射(右)光谱
2,产品优势:
(1)灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBRGreen I;
(2)稳定性强:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶,室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强;
(3)适用性广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于dsDNA*ssDNA或RNA染色;与观察EB的普通紫外凝胶透射仪观察即可(蓝光切胶仪),在300 nm紫外光附近可得到最佳激发,标准的EB滤光片或SYBR滤光片都适用;
(4)操作简单:与EB一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗,即可直接用紫外凝胶透射仪观察;
(5)信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低;
n 操作步骤
一、胶染法(前染法)(用法同EB,推荐)
1.制胶时加入,使其在凝胶中的终浓度为1×,每50 mL 琼脂糖溶液中加入5 μL的10000×储液,以此比例类推(因为非常灵敏,电泳过程中DNA marker 上样量只需1-2 μL,而不是EB电泳中的5 μL,请严控DNA marker 上样量)
2.按常规方法电泳,观测结果。
注:由于BLT-GRed具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。含有染料的预制凝胶溶液可以大量制备,并长期保存直到使用,此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
二、泡染法(后染法)
1.按照常规方法进行电泳。
2.用dH2O将10000×储液稀释约3300倍到0.1 M NaCl中,制成3×染色液。(例如将15 μL的10000×储液和5 mL 1M NaCl加到45 mL dH2O中)。
3.将凝胶小心放入合适的容器中,缓慢加入足量的3×染色液浸没胶。室温振荡染色约30 min即可,最佳染色时间根据凝胶厚度及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于3.5-10%丙烯酰胺胶,染色时间通常介于30 min - 1 h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。然后观测结果。
n 注意事项
1.BLT-GRed不能被488 nm氩离子激光器或相似波长的可见光完全激发,因此不推荐使用此类激发装置的成像系统。
2.为了您的自身安全,实验前请做好有效防护;
3.本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内!