产品规格
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 售价（元） |
BLT Trans-D细胞转染试剂 | TD001 | 50 μL | 250 |
TD002 | 0.75 mL | 890 |
产品简介
本产品Trans-D细胞转染试剂为新一代的阳离子聚合物转染试剂，专用于质粒DNA的递送。可适用众多易转染细胞株的DNA质粒转染，瞬时转染，及稳定转染细胞的构建。此转染试剂经验证在常规细胞如Hela，293T、COS7、CHO和B16F10等具有较高的转染效率，对原代细胞，干细胞等难转染细胞也具有较高的转染效率，与其它转染试剂相比，具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。
保存条件
常温或冰袋（wet ice）运输；2-8 °C保存，有效期一年（不可冷冻）。
转染实例对比
使用说明
DNA转染（以24孔板为例）:
（1）细胞培养：在转染前一天(12-24小时)按照每孔约0.5~1.0*105个细胞接种到孔板内进行培养，使第二天细胞密度能达到约60-80%。
注：具体的细胞数量根据孔板类型，细胞类型和细胞生长速度等而定，保证细胞融合度在60%以上。
（2）质粒DNA和转染试剂复合物形成：按照下表对质粒DNA和转染试剂用无血清培养基或者 Opti-MEM 培养基分别进行稀释，然后将稀释好的转染试剂尽快全部加入到已稀释好的质粒DNA中，轻轻混匀，室温复合10-15 min，混合顺序不可反向进行。
注：稀释液需保证无抗生素和无血清，复合物的形成过程不能含有血清。
| 96-Well | 48-Well | 24-Well | 12-Well | 6-Well | 6cm dish | 10cm dish |
培养液体积 | 0.2 mL | 0.3 mL | 0.5 mL | 0.75 mL | 1 mL | 3 mL | 9 mL |
稀释液体积 | 10 μL | 25 μL | 40 μL | 60 μL | 0.125 mL | 0.25 mL | 0.5 mL |
DNA/质粒用量 | 0.2 μg | 0.5 μg | 1.0 μg | 1.5 μg | 3.0 μg | 3.0 μg | 6.0 μg |
转染试剂用量 | 0.6 μL | 1.5 μL | 3.0 μL | 4.5 μL | 9.0 μL | 18.0 μL | 36.0 μL |
以24孔板为例：①将1.0 μg质粒加入无血清培养液稀释至40 μL；②将3.0 μL转染试剂加入无血清培养液稀释至40 μL；③稀释好的转染试剂尽快全部加入到已稀释好的质粒DNA中，室温静置10-15 min。 |
复合物加入总量 | 2×10 μL | 2×25 μL | 2×40 μL | 2×60 μL | 2×0.125 mL | 2×0.25 mL | 2×0.5 mL |
注：该表使用量仅供参考，具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化，对于难转染的细胞可通过改变细胞密度，DNA浓度，转染试剂浓度对转染条件进行优化，转染试剂(μL)：DNA(μg)可以在2:1和5:1之间调整。
（3）转染培养：将上述80 μL复合物均匀加入到24孔板中，轻轻晃动培养皿或轻微振荡，继续培养18-48小时后检测转染效率，无需更换培养基。
（4）筛选稳转株：转染培养细胞24 h后，将细胞传代至新鲜的生长培养基中（将细胞稀释10倍以上），在37 °C，5% CO2培养箱中孵育24 h，加入筛选培养基。在有转染抗性基因相匹配的药物筛选条件下，约1～2周可筛选到耐药性克隆，在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。
注意事项
1．为了您的自身安全，实验前请做好有效防护；
2．形成的转染复合物勿离心，若想将粘附管壁复合物离心，请务必极低转速离心，如50g离心5s；
3．为保证较高的转染效率，请使用高纯度、无菌、无污染物的质粒进行转染，通过260 nm光吸收测定DNA浓度，260 nm/280 nm 比值确定DNA纯度（比值应该在1.8～2.0的范围之内；
4．转染试剂可用于有血清培养基的转染，并且转染前不需要换培养基。但是，制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释DNA和转染试剂，转染时培养液中不添加抗生素；
5．本品为DNA质粒的专用转染试剂，也可以用于RNA的转染，但对RNA的转染的条件需要摸索，如有需要订购RNA专用转染试剂；
6．本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内！