试剂产品

产品规格

产品简介

BLT 488-鬼笔环肽为Alexa Fluor 488荧光标记的鬼笔环肽，可发出高亮度、光稳定的绿色荧光，染色反应特异性强，专门用于对生物样本进行标记和检测。鬼笔环肽是一种具有多个氨基酸链的天然化合物，化学结构特别，由一个五元环和两个七元环组成。这种结构使得它能够与某些分子特异性结合，具有高亲和力和良好的特异性。而AF488则是一种荧光染料，与鬼笔环肽结合后，能够产生强烈的荧光信号。

BLT 488-鬼笔环肽最大激发/发射波长（Ex/Em）为493/517 nm，以橙色的冻干粉形式提供，溶于DMSO。

保存条件

冰袋（wet ice）运输；-20℃避光干燥保存，24 个月有效。

使用说明

1、储液制备：

        取适量甲醇或无菌水溶解棕色BLT488-鬼笔环肽管中冻干的粉末，制备成 200T/mL 的储液（300T 规格染料加入 1.5 mL 的液体，50T 规格染料加入 0.25 mL 的液体即可）。

       BLT 488-鬼笔环肽的一个单位（T）的定义是染色一个加载细胞的载玻片所用染料的量。对于BLT 488-鬼笔环肽，使用时的推荐稀释比例为 1: 40-1: 200，一个单位相当于 200 μL 总染色体积中加入 1-5 μL 200T/mL 储备溶液。

注：稀释比例可以根据实际染色效果进行适当调整。

2、固定细胞染色：

以下方案是针对生长在玻璃盖玻片或 8 孔室玻片上的贴壁细胞的染色步骤。BLT 488-鬼笔环肽也可用于染色固定的冷冻或石蜡组织切片。

（1）用 PBS 清洗细胞 3 次。

（2）用含有 4%甲醛的 PBS 溶液固定细胞，室温固定 20 min。

注：甲醇可以在固定过程中破坏肌动蛋白。因此最好避免含有任何甲醇的固定剂。优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。

（3）用 PBS 清洗细胞 3 次。

（4）用含 0.5% Triton X-100 的 PBS 溶液在室温下透化细胞 10 min。

（5）用 PBS 清洗细胞 3 次。

（6）用 200 μL PBS 稀释 1-5 μL BLT 488-鬼笔环肽储液，加入一个盖玻片或孔中，室温孵育 20 min，进行染色。

注：染色体积可根据样本情况进行调节。孵育过程中为避免染液挥发，可将盖玻片放于密封容器内。

（7）用 PBS 清洗细胞 2-3 次。

（8）荧光显微镜观察。BLT 488-鬼笔环肽具有很好的光稳定，样品可以在 PBS 中成像，但为了效果最佳，也可以使用抗荧光淬灭剂观察。

3、活细胞染色：

      BLT 488-鬼笔环肽不具有细胞透性，因此没有被广泛用于活细胞标记。然而，有报道称活细胞可能通过胞饮或未知机制进行标记。一般来说，染色活细胞时需要更多的染料。或者，BLT 488-鬼笔环肽也可被注入到细胞中用于监测肌动蛋白分布和细胞运动。

注意事项

1. 鬼笔环肽具有毒性，需小心操作（对人的半数致死剂量 LD50 约 2mg/kg）。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内！

3. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。

4. 本产品为冻干粉形式，微量不易观察，使用前请瞬时离心，加适当溶剂溶解后使用，溶解后的溶液近乎透明色。