蛋白免疫印迹(WB)技术实验服务
n 货号
DZWB001、DZWB002
n 服务简介
WB(Western blot),即蛋白印迹或免疫印迹(immunoblotting),通过凝胶电泳按照分子量大小分离蛋白,然后再利用特异性抗体识别这些蛋白,是一项在分子生物学、生物化学、免疫学等领域中应用非常基础广泛的技术。博鹭腾生物提供传统化学发光免疫印迹(酶标记)和荧光免疫印迹。
n 服务优势
具有专业的蛋白印迹检测成像仪器和技术团队。
为客户提供多种免疫印迹检测方式及科研服务流程。
n 检测流程
样品制备→蛋白质检、定性定量→凝胶制备→凝胶电泳→转膜→封闭→一抗、二抗孵育→成像分析
n 客户提供内容
待检测样品:新鲜或正确保存的组织、细胞或裂解蛋白样品(动植物组织:>200mg,动植物细胞:>1×106个);请采样后立刻放入液氮中速冻或加入样品稳定剂;
一抗和内参抗体:普通一抗和内参抗体可由博鹭腾提供;特殊一抗/二抗可委托本司购买,费用自付;
提供相应的材料背景:目的蛋白相关资料,必要的实验设计等;
运输要求:干冰或液氮包装寄送,样本应避免各类污染和反复冻融。
n 检测交付内容
①考马斯亮蓝对电泳胶的染色结果
②转膜后的丽春红染色图
③曝光后的蛋白表达条带(化学发光法或荧光法)
④对蛋白表达图的灰度值分析
⑤实验过程报告
n 服务说明
| 化学发光检测法 | 荧光检测法 |
主要优点 | 极高灵敏度 | 同时检测多个靶标 |
技术概述 | 增强型化学发光 (ECL) HRP 和AP底物实现皮克到飞克极的检测水平 | 使用一抗和荧光基团标记二抗组合,在同一印迹上同时检测多种蛋白质 |
信号源 | 酶促反应的间接信号 | 荧光基团的直接信号 |
信号持续时间 | 短暂(几小时) | 长(数周至数月) |
灵敏度 | 优异 | 良好 |
一致性 | 不同印迹之间可能存在差异,可以通过使用信号稳定持久的底物来减少差异 | 不同印迹之间的重现性高 |
检测 | X光胶片和成像仪 | 成像仪:能够激发荧光基团并检测随后的发射光 |
其他注意事项 | ①可以对印迹剥离并重新检测②可以进行长时间的曝光,因为不需要激发光源来捕捉信号 | ①需要注意避免荧光污染 ②随着多重检测靶点数量的增加(避免抗体交叉反应),抗体的选择越来越有难度 |
服务周期 | 5-7天,多个样品试情况而定 | 5-7天,多个样品试情况而定 |
费用 | 1500-2000/单样,多个样品试情况而定 | 2000-2500/单样,多个样品试情况而定 |
n 服务流程及说明
1、请联系技术支持人员,填写实验服务委托书,与我司商定具体的检测实验设计方案、费用。
2、客户支付服务款项,并提供待测样品及相关信息等,我司按照合同要求安排检测实验服务。
3、检测服务完成后,我司按照客户要求免费邮寄样品。
4、因科学实验的不确定性,实验结果不一定会出现阳性结果,我们保证实验结果的真实准确性,但是对结果是否符合预期不做承诺。